杜小东1，罗利飞2
１．医院检验科，浙江兰溪３２１１００；
２．浙江省台州恩泽医疗中心（集团）医院检验科，浙江台州３１８０５０
来源中国微生态学杂志２０１９年２月第３１卷第２期-
摘要目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者肠道菌群和肠黏膜屏障的变化及益生菌的干预作用?
方法选取年1月-年12月内科门诊就诊活动期U患者50例为观察组,予以双歧杆菌三联活菌胶囊2粒/次(mg/粒),饭后30min温水送服,2次/d,连用8周?检测观察组治疗前与治疗后肠道菌群数量及肠黏膜屏障指标的变化?另选择同期肠镜检查未见肠道病变的正常成人30例为对照组?
结果观察组患者治疗前双歧杆菌和乳杆菌的数量明显少于对照组,而大肠杆菌数量明显多于对照组(Ps0.05)?治疗8周后,观察组患者双歧杆菌和乳杆菌的数量较治疗前明显上升(Ps0.05),但仍明显低于对照组(Ps0.05);而大肠杆菌数量较前明显下降(Ps0.05),但仍明显高于对照组(Ps0.05)?同时观察组患者治疗前血清ET?D-乳酸和PCT水平明显高于对照组(Ps0.05)?治疗8周后,血清ET?D-乳酸和PCT水平较治疗前明显下降(Ps0.05),但仍明显高于对照组(Ps0.05)?
结论双歧杆菌三联活菌胶囊治疗活动性ＵＣ能纠正患者肠道菌群紊乱，修复肠黏膜屏障。
关键词溃疡性结肠炎；肠道菌群；肠粘膜屏障；双歧杆菌三联活菌胶囊
中图分类号R
文献标识码A
文章编号-X()02--04
ＤＯＩ编码10./j.cnki.cjm.0
溃疡性结肠炎（UC）是一种反复发作的原因不明的慢性直结肠黏膜炎症性疾病，其病情较顽固，处理较困难[1-2]。UC的病因及发病机制至今仍未完全阐明，研究发现肠道菌群紊乱以及引起的肠黏膜屏障功能障碍在其发病中起到极其重要的作用[3-4]。双歧杆菌三联活菌胶囊是一种临床常用的益生菌制剂，近年来研究发现其治疗溃疡性结肠炎的效果较好，但其是否具有调节肠道菌群及保护肠黏膜屏障的作用国内外报道较少[5-6]。本研究分析了UC患者肠道菌群及肠黏膜屏障功能与正常成人的差异，并探讨了溃疡性结肠炎予以双歧杆菌三联活菌胶囊干预前后肠道菌群及肠黏膜屏障功能的变化。
１.资料与方法1.1一般资料
选取年1月－年12月在我院内科门诊就诊的活动期UC患者50例为观察组。入组标准：（1）符合《对我国炎症性肠病诊断治疗规范的共识意见（版）》中的诊断标准[7]；（2）病情为轻中度，病程＞3个月。排除标准：（1）重度UC或UC发生并发症患者；（2）既往有胃肠道手术史或原有器质性的胃肠道疾病史；（3）长期服用氨基水杨酸制剂、激素和免疫抑制剂、抗生素或止泻药。另选择同期在我院体检的肠镜检查未见肠道病变的正常成人30例为对照组。两组性别、年龄、体重等差异无统计学意义（Ps＞0.05），具有可比性。见表１。
1.2治疗方法
观察组患者予以双歧杆菌三联活菌胶囊（上海信谊药厂有限公司，其组分为长型双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和粪肠球菌，含活菌数≥1.0×10?CFU，规格：mg/粒）２粒／次，饭后30min温水送服，2次/d，连用8周。检测观察组治疗前与治疗８周后肠道菌群数量及肠黏膜屏障指标的变化。对照组仅在纳入研究时测定肠道菌群数量及肠黏膜屏障指标１次。
1.3观察方法
1.3.1肠道菌群检测[8]取清晨无菌新鲜粪便3g进行离心洗涤,采用粪便DNA组提取试剂盒(TIANGEN,DP-02)提取细菌总DNA?应用real-timePCR试剂盒(Takara,RRA)扩增粪便DNA,其中PCR引物序列见表2?根据反应后的扩增曲线计算乳杆菌?双歧杆菌和大肠杆菌数量,以lgCFU/g湿便的形式计算每克标本中的含菌量?1.3.2肠黏膜屏障检测通过检测血清内毒素(ET)?D-乳酸和降钙素原(PCT)间接评估肠黏膜屏障功能,采集患者晨起8点时的空腹静脉血4~6mL,r/min,4℃离心15min分离出上层血清,冻存于-70℃冰箱,分别采用酶联免疫吸附法?分光光度法和化学发光法测定ET?D-乳酸和PCT的水平?1.4数据处理
采用SPSS20.0软件,符合正态分布的计数资料以均数±标准差(x±s)形式表示,采用t检验,检验水准α为0.05?2.结果2.1对照组及观察组患者治疗前后肠道菌群数量比较
观察组患者治疗前双歧杆菌和乳杆菌的数量明显少于对照组,而大肠杆菌数量明显多于对照组(Ps0.05)?治疗8周后,观察组患者双歧杆菌和乳杆菌的数量较治疗前明显增多(Ps0.05),但仍明显低于对照组(Ps0.05);而大肠杆菌数量较前明显下降(Ps0.05),但仍明显多于对照组(Ps0.05)?见表3?2.2对照组及观察组患者治疗前后血清ＥＴ、Ｄ－乳酸和ＰＣＴ水平比较
观察组患者治疗前血清ET?D-乳酸和PCT水平明显高于对照组(Ps0.05)?治疗8周后,血清ET?D-乳酸和PCT水平较治疗前明显下降(Ps0.05),但仍明显高于对照组(Ps0.05)?见表4?３.讨论3.1活动性UC患者肠道菌群及肠黏膜屏障情况UC患者的病因及发病机制十分复杂,近年来研究发现UC患者存在肠道微生态平衡紊乱,肠道有益菌数量下降而致病菌趁机大量繁殖使得其数量明显上升[9-11];而肠道菌群紊乱,破坏肠道“菌膜”屏障,使得肠黏膜受损引起肠黏膜屏障功能障碍[12-13]?本研究结果显示,观察组患者双歧杆菌和乳杆菌的数量明显少于对照组,而大肠杆菌数量明显多于对照组,提示活动性UC患者存在肠道菌群紊乱?姜洋等[14]通过高通量测序技术发现UC患者的肠道菌群整体结构与健康对照人群具有显著的差异,主要表现为拟杆菌门?变形菌门和厚壁菌门丰度降低?白鹏等[15]通过实时荧光定量PCR定量检测发现活动性UC患者粪便双歧杆菌?乳杆菌这两种有益菌较正常对照明显减少,而大肠杆菌和肠球菌数量无明显变化?这可能与实验误差?饮食结构不同或者是肠道微生态环境太复杂有关?同时研究还发现观察组患者血清ET?D-乳酸和PCT水平明显高于对照组?提示活动性UC患者存在肠黏膜屏障功能障碍,肠黏膜间隙变大,通透性异常升高?3.2双歧杆菌三联活菌胶囊对活动性UC患者肠道菌群及肠黏膜屏障的影响双歧杆菌三联活菌胶囊是一种临床常用的微生态制剂,口服后附着于肠黏膜并大量生长繁殖直接补充肠道有益菌,竞争性拮抗致病菌在肠道的定植和生长,促进肠道正常菌群的恢复,维持肠道菌群平衡,重建肠道屏障[16-18];还可刺激肠黏膜局部相关淋巴组织,激活局部防御功能,增加肠道抗感染能力[19-21]?本研究显示治疗8周后,观察组患者双歧杆菌和乳杆菌的数量较治疗前明显上升,大肠杆菌数量较治疗前明显下降,血清ET?D-乳酸和PCT水平较前明显下降?提示双歧杆菌三联活菌胶囊治疗活动性UC患者能调节肠道菌群紊乱,修复肠黏膜屏障功能?总之,双歧杆菌三联活菌胶囊治疗活动性UC患者能调节肠道菌群,修复肠黏膜屏障功能?由于本研究纳入样本量少,观察时间短?临床患者存在个体差异,且其具体服用频次?服用剂量及服用多久效果最佳等问题,还需要采用大样本多中心的临床研究进一步证实?[参考文献]
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